Prueba de pirógenos del extracto total proteico de Candida albicans mediante la técnica de LAL (lisado de amebocitos de Limulus)

Resumen

OBJETIVO: Conocer si las proteínas que forman el extracto total proteico de C. albicans son pirogénicas o pueden administrarse en pacientes con seguridad y confianza.

MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio prospectivo efectuado de febrero a noviembre de 2022, en el que se utilizaron cultivos de Candida albicans, los cuales fueron sometidos a sonicación para la posterior precipitación de proteínas por el método de salting out y su separación y purificación por SDS-PAGE y electroelución, para obtener las proteínas separadas y posteriormente someterlas a la prueba de pirógenos (LAL), tanto a las proteínas individuales como en su conjunto en el extracto total proteico.

RESULTADOS: La prueba de LAL para cada uno de los péptidos probados (85, 75, 65, 47, 40, 35 y 28 kDa) fue negativa y al no tener una respuesta positiva a una sensibilidad de 0.06 UE/mL, no se consideran endotóxicas; para el extracto total (candidina) la concentración de endotoxina es de 0.085 UE/mL y el máximo de 5 UE/mL.

CONCLUSIONES: El extracto total de Candida albicans (candidina) tiene mínima actividad de endotoxina, por lo que puede administrarse por vía parenteral.

PALABRAS CLAVE: Candida albicans; verrugas; candidina; endotoxina; inmunoestimulación.

Abstract

OBJECTIVE: To know if the proteins that form the total protein extract (PET) of C. albicans are pyrogenic or can be used in patients safely and confidently.

MATERIALS AND METHODS: Prospective study carried out from February to November 2022, in which Candida albicans cultures were used, which were subjected to sonication for the subsequent precipitation of proteins by the salting out method and their separation and purification by SDS-PAGE and electroelution, to obtain the separated proteins and subsequently submit them to the pyrogen test (LAL) both to the individual proteins and as a whole in the total protein extract.

RESULTS: The LAL test for each of the peptides tested (85, 75, 65, 47, 40, 35 and 28 kDa) was negative and since there was no positive response to a sensitivity of 0.06 UE/mL, the endotoxin concentration is 0.085 UE/mL and the maximum is 5 UE/mL, so they are not considered endotoxic for the total extract (candidine).

CONCLUSIONS: The total extract of Candida albicans (candidine) has a minimal activity of endotoxin, so it can be administered parenterally.

KEYWORDS: Candida albicans; Warts; Candidin; Endotoxin; Immunostimulation.