Determinación de receptores tipo Toll y citocinas proinflamatorias de queratinocitos humanos (HaCaT), estimulados con Candida albicans y Candida glabrata (Nakaseomyces glabrata)

Resumen

OBJETIVO: Estudiar la activación de la respuesta inmunitaria innata de queratinocitos HaCaT con Candida albicans o Candida glabrata (N. glabrata) vivas y muertas determinando la expresión relativa (RT-qPCR) de las quimiocinas IL-8, MCP-1, las citocinas proinflamatorias IL-1β, TNF-α y TGF-β y los receptores tipo Toll 2, 4 y 6.

MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio experimental, efectuado de noviembre de 2024 a abril de 2025, en el que se utilizaron cultivos de queratinocitos HaCaT estimulados con cepas de Candida albicans ATCC 10231 o Candida glabrata (N. glabarata) (aislamiento clínico). Con la técnica de RT-qPCR se evaluó la presencia de quimiocinas (IL-8 y MCP-1), citocinas proinflamatorias (IL-1β, TNF-α y TGF-β) y receptores celulares tipo Toll 2, 4 y 6.

RESULTADOS: Al estimular los queratinocitos con C. albicans viva, la mayor expresión se encontró en la IL-8 y el MCP-1. El TNF-a mostró el valor más alto de las citocinas proinflamatorias. Al estimular con la cepa muerta, la expresión de las citocinas y quimiocinas disminuyó de manera considerable. Al utilizar C. glabrata viva, la quimiocina con mayor expresión fue la IL-8. Al estimular con C. glabrata muerta, el MCP-1 dio la mayor expresión, las citocinas cayeron a un mínimo y el TLR 6 se mantuvo.

CONCLUSIONES: La estimulación de la respuesta inmunitaria innata de queratinocitos HaCaT por C. albicans o por C. glabrata (Nakaseomyces glabrata) se favorece ante levaduras vivas. Las citocinas proinflamatorias y quimiocinas secretadas (IL-8 y MCP-1) muestran títulos más altos con Candida albicans.

PALABRAS CLAVE: Candida albicans; Candida glabrata; queratinocitos; citocinas; receptores tipo Toll.

Abstract

OBJECTIVE: To study the activation of the innate immune response of HaCaT keratinocytes with live and dead Candida albicans or Candida glabrata (Nakaseomyces glabrata) determining the relative expression (RT-qPCR) of the chemokines IL-8, MCP-1 and the pro-inflammatory cytokines IL-1β, TNF-α and TGF-β, as well as Toll-like receptors 2, 4 and 6.

MATERIALS AND METHODS: Experimental study conducted from November 2024 to April 2025 in which HaCaT keratinocyte cultures were used, stimulated with strains of Candida albicans ATCC 10231 or Candida glabrata (N. glabrata) (clinical isolate), evaluating the presence of chemokines (IL-8 and MCP-1), pro-inflammatory cytokines (IL-1β, TNF-α, and TGF-β), and Toll-like receptors (2, 4, and 6) using the RT-qPCR technique.

RESULTS: By stimulating the keratinocytes with live C. albicans, the highest expression was found in IL-8 and MCP-1. TNF-α showed the highest value among pro-inflammatory cytokines. When stimulated with the dead strain, the expression of cytokines and chemokines decreased considerably. When using live C. glabrata, the chemokine with the highest expression was IL-8. When stimulated with dead C. glabrata, MCP-1 showed the highest expression, cytokines dropped to a minimum, and TLR 6 maintained its presence.

CONCLUSIONS: The stimulation of the innate immune response of HaCaT keratinocytes by C. albicans or C. glabrata (Nakaseomyces glabrata) is favored when live yeasts are presented. Pro-inflammatory cytokines and secreted chemokines (IL-8 and MCP-1) showed higher titers with Candida albicans.

KEYWORDS: Candida albicans; Candida glabrata; Keratinocytes; Cytokines; Toll-like receptors.