Resumen
ANTECEDENTES: el micetoma es un síndrome inflamatorio común en México que afecta principalmente la piel, el tejido subcutáneo y en menor medida la fascia, los músculos e incluso los huesos y los órganos internos. Es causado por actinomicetos (actinomicetoma) o por hongos verdaderos (eumicetoma). La inflamación intensa logra penetrar los granos de actinomicetoma por la liberación de enzimas como la β-glucuronidasa.
OBJETIVO: evaluar la degradación del polisacárido neutro presente en los granos formados por Nocardia brasiliensis, tratados con β-glucuronidasa de neutrófilos.
MATERIAL Y MÉTODO: en granos provenientes de pacientes con actinomicetoma por N. brasiliensis se realizaron dos estudios que consistieron en: a) cuantificación de la diferencia de peso de los granos tratados con β-glucuronidasa proveniente de neutrófilos y b) cuantificación de azúcares totales liberados en la degradación del polisacárido de los granos de N. brasiliensis, por el método de fenol-sulfúrico. Además, en cortes histológicos de piel de pacientes con actinomicetoma por N. brasiliensis atendidos en el Centro Dermatológico Dr. Ladislao de la Pascua se realizó la determinación de la actividad enzimática de la β-glucuronidasa presente en los granos, utilizando el paquete de enzimas linfocitarias de Sigma Aldrich número 181-C.
RESULTADOS: la diferencia en la cuantificación del peso de granos de N. brasiliensis después de 96 horas de tratamiento con β-glucuronidasa proveniente de neutrófilos fue de 58% en promedio. La concentración de azúcares totales en sobrenadantes provenientes de la degradación de granos de N. brasiliensis fue de 27.2 y 21 mg/mL al utilizar 200 y 100 unidades/mL de enzima, respectivamente. La actividad de β-glucuronidasa en cortes histológicos de pacientes con micetoma por N. brasiliensis se confirmó al observar la coloración roja característica de la reacción de la enzima con el sustrato Naftol AS-BI β-D-ácido glucurónico.
CONCLUSIÓN: la enzima β-glucuronidasa de neutrófilos muestra buena actividad enzimática sobre el cemento de unión (polisacárido neutro) de los granos del actinomicetoma por N. brasiliensis.
Palabras clave: Nocardia brasiliensis, micetoma, β-glucuronidasa
Abstract
BACKGROUND: Mycetoma is a common inflammatory syndrome in Mexico that mainly affects the skin, subcutaneous tissue and to a lesser extent, fascia, muscles and even bones and internal organs. It is caused by actinomycetes (actinomycetoma) or true fungi (eumycetoma). Intense inflammation penetrates grains actinomycetoma by releasing enzymes such as β-glucuronidase.
OBJECTIVE: To evaluate neutral polysaccharide degradation in the grains with Nocardia brasiliensis β-glucuronidase treated of neutrophils.
MATERIAL AND METHOD: Three studies were conducted in grains of patients with actinomycetoma by N. brasiliensis assisted at the Dermatological Center Ladislao de la Pascua, Mexico City: a) Quantification of the difference in weight of grains treated with β-glucuronidase from neutrophils. b) Quantification of total sugars released by polysaccharide degradation of N. brasiliensis grains, by the phenol-sulfuric method. c) In histological sections provided by the same hospital, the determination of the enzymatic activity of β-glucuronidase present in the grains, with the use of the kit of lymphocyte enzymes Sigma Aldrich No. 181-C was performed.
RESULTS: Difference in weight in grains of N. brasiliensis treated with β-glucuronidase from neutrophils after 96 hours of treatment was 58% on average, when using an enzyme concentration of 200 and 100 units/mL. Concentration of total sugars by the method of phenol-sulfuric, supernatants from degradation grains N. brasiliensis using 195 units/mL of enzyme was 27.2 mg/mL and 97 units/mL of enzyme was 21 mg/mL. Enzymatic activity of β-glucuronidase was observed in red color, which is result of the reaction of Naphthol AS-BI-β-D glucuronic acid.
CONCLUSION: β-glucuronidase enzyme from neutrophils has good enzymatic activity on the cement binding (neutral polysaccharide) of grains of actinomycetoma caused by N. brasiliensis.
Keywords: Nocardia brasiliensis, mycetoma, β-glucuronidase
